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芽孢杆菌作用
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如何测定枯草芽孢杆菌菌数

2020-09-16 01:20:27

芽孢杆菌价格小编向大家详细介绍枯草芽孢杆菌菌数测定方法:


1、平板培养计数简介

平板培养计数是根据微生物在高度稀释条件下,其在固体培养基上所形成的单个菌落是由一个细菌繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个细菌。计数时,首先将待测样品进行系列稀释,尽量使样品中的细菌分散开,使成单个存在(否则一个菌落就不只代表一个细菌),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由一个细菌生长繁殖形成单个菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的菌数。


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2、操作步骤

(1)样品稀释液的制备 准确称取待测样品10ml,放入装有90ml无菌生理盐水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使细菌分散,静置20S~30S,即成10-1稀释液;再用1ml无菌吸管,吸取10-1稀释液lml,移入装有9ml无菌生理盐水的试管中,吹吸3次,让菌液混合均匀,即成10-2稀释液;再换一支无菌吸管吸取10-2稀释液1ml,移入装有9ml无菌生理盐水的试管中,也吹吸3次,即成10-3稀释液;以此类推,连续稀释,制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液。


(2)计数细菌数 平板涂布培养法:先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上(每个编号设三个重复)。再用无菌刮铲将菌液在平板上涂布均匀,每个稀释度用一个无菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。在由低浓度向高浓度涂布时,也可以不更换刮铲。将涂布好的平板平放于桌上20min~30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,置35℃~37℃,培养24h~48h,计数菌落。

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